Après être sortie diplômée de l'École nationale supérieure des arts et techniques du théâtre de Lyon en 2000, Audrey Fleurot joue dans de nombreuses pièces de théâtre et apparaît aussi à la télévision, notamment dans l'un des épisodes de la série Blague à part. Mais c'est grâce au succès de Kaamelott, où elle campe un personnage récurent tout au long des 6 saisons, qu'elle se fait remarquer. Dans un autre registre, elle joue à partir de 2005 le rôle d'une avocate dans la série Engrenages